Transgenicos  de diabetes mellitus 

La diabetes no insulinodependiente es un desorden metabólico muy común en la actualidad. Comprende una variedad de síndromes con distintas etologías que afectan colectivamente del 1 al 6% de la población mundial. Además la diabetes incrementa el riesgo de desarrollo de arteriosclerosis prematura y aumenta la mortalidad por infarto de miocardio, enfermedad cerebro vascular y vascular periférica.

El objetivo de la investigación es obtener un animal transgénico no humano que sobreexpresa el gen P-enolpiruvato carboxiquinasa para su uso en el estudio de la diabetes mellitus y el desarrollo de aproximaciones terapéuticas a la enfermedad.

En la intervención nos referimos a un minigen obtenido tras substitución de intrones y exones del gen de la P-enolpiruvato carboxiquinasa (PEPCK) por el fragmento correspondiente de su propio cDNA a fin de poder diferenciarlo del gen endógeno de la PEPCK en un análisis por Southern blot del DNA aislado de un animal transgénico.

Por lo tanto la sobreexpresión de la PEPCK en animales transgénicos no humanos causa hiperglucemia, resistencia a la insulina 

  

Ventajas 

• Es posible introducir genes mutantes de humanos en ratones provocando así que padezcan enfermedades, con el fin de encontrar tratamientos sin la necesidad de experimentar con seres humanos.
• Los animales se pueden modificar de modo que tengan un crecimiento más rápido y resistan a las enfermedades. 
• Los animales de cría se utilizan para producir medicamentos y nutracéuticos. 
• Velocidad: se puede establecer una característica específica deseada en una generación e introducir nuevas características con el fin de reducir las necesidades alimenticias y de tratamientos médicos.
• Permiten realizar transplantes de órganos animales (xenotransplantes)

 
Desventajas 

•  la anatomía humana es mucho más compleja que la de los animales
• .La inserción de un trasgen puede alterar la expresión del genoma y por tanto provocar anomalías fisiológicas en el animal. 
• Transmisión de virus mediante xenotransplantes.
•  Los transgenes podrían transmitirse a la población silvestre a través de la reproducción normal.  Lugar de integración indeterminado (efecto de posición)

• Bibliográfia: http://ddd.uab.cat/pub/patents/2001/98420/ES2156460A1.pdf.

ADN recombinante en la naturaleza 

El DNA recombinante es una herramienta fundamental de la ingeniería genética, este contiene partes de genes de diferentes organismo, muchos de ellos de especies distintas. Estos se pueden cultivar en bacterias virus o levaduras para luego transferirlas a otras especies, incluidos plantas y animales. Estos animales y plantas obtenidos se conocen como transgénicos. En la naturaleza el DNA se recombina de forma natural mediante procesos como la reproducción sexual, la transformación bacteriana y la infección viral. 

El entrecruzamiento durante la meiosis I intercambia DNA de cada cromosoma materno con el DNA homologo del cromosoma paterno. Las bacterias poseen recombinaciones que hacen posible la transferencia de genes entre especies no afines, transformación,  es el proceso que permite a las bacterias capturar DNA libre del medio ambiente. También ocurre transformación cuando las bacterias capturan diminutas moléculas llamadas plásmidos.

 

ADN  recombiananter en diabetes 

Es una célula de ADN artificial integrada de manera deliberada in vitro por la desunión de secuencias de ADN provenientes de dos organismos distintos que normalmente no se encuentran juntos.

Estas técnicas se emplean para la síntesis de proteínas en gran escala, ya que podemos hacer que una bacteria produzca una proteína humana y lograr una superproducción, como en el caso de la insulina humana, que es elaborada por bacterias en grandes recipientes de cultivo, denominados biorreactores.

 

 

 

 

 

 

PASOS:

• Se aisló y se cortó el gen productor de la insulina humana del resto de ADN humano.
• Se insertó dicho gen en la bacteria Escherichia coli.
• Se potenció la multiplicación de las E. coli transgénicas que producían insulina en cultivos bacterianos para obtener un gran número de ella.
•   De esa población de E. coli se extraía la insulina producid

 
 Se fabricó gracias a la tecnología recombinante medicamento llamado Exubera, es una insulina de acción rápida humana producida por ADN recombinante en forma de polvo para ser inhalada. La insulina inhalable que al alcanzar el espacio alveolar, atraviesa los neumocitos por transcitosis, y llega a la circulación sanguínea. Pero que fue retirada del comercio por su alto costo, y por ser menos eficaz que la insulina inyectable.

Bibliografia:

• http://www.redalyc.org/pdf/1812/181220509063.pdf
• http://naukas.com/2012/01/05/exitos-transgenicos-la-insulina/ 

Novedades de investigación molecular para  diabetes 

Pruebas moleculares para insulino dependientes 

Se plantea realizar esta técnica para pacientes con Diabetes insulino dependiente a partir de un principio analítico denominado ELISA, en este se utilizan dos moléculas denominadas GAD e IA-2 en forma recombinante y en cantidades apropiadas, con el definimos el tipo de DM e cada paciente.

En los diabeticos, las células beta son agredidas por células el sistema inmune, por esto se generan autoanticuerpos específicos para los componentes moleculares de las propias células beta. Estos autoanticuerpos, también denominados "marcadores", comienzan a reproducirse mucho antes de que la enfermedad se manifieste. El método ELISA desarrollado trabaja mediante la detección de estos marcadores que se encuentran en la sangre, a través de dos autoantigenos recombinantes, algo alterados ex profeso respecto de las moléculas naturales y que se denominan Trx-GAD e IA-2ic.

La prueba fue desarrollada por El Laboratorio de Inmunoendocrinologia (LIE), dependiente de la Universidad de Buenos Aires y del CONICET.

La prueba molecular de la diabetes que se plantea, se caracteriza por ser económica, eficiente, además e no contaminar al medio ambiente en su realización.

Bibliografia:   http://www.agencia.mincyt.gob.ar/frontend/agencia/post/846.

Novedades de investigación molecular para DIABETES

PRUEBAS MOLECULARES : DIABETICOS INSULINOS DEPENDIENTES

Se plantea realizar esta técnica para pacientes con Diabetes insulino dependiente a partir de un principio analítico denominado ELISA, en este se utilizan dos moléculas denominadas GAD e IA-2 en forma recombinante y en cantidades apropiadas, con el definimos el tipo de DM e cada paciente.

En los diabeticos, las células beta son agredidas por células el sistema inmune, por esto se generan autoanticuerpos específicos para los componentes moleculares de las propias células beta. Estos autoanticuerpos, también denominados "marcadores", comienzan a reproducirse mucho antes de que la enfermedad se manifieste. El método ELISA desarrollado trabaja mediante la detección de estos marcadores que se encuentran en la sangre, a través de dos autoantigenos recombinantes, algo alterados ex profeso respecto de las moléculas naturales y que se denominan Trx-GAD e IA-2ic.

La prueba fue desarrollada por El Laboratorio de Inmunoendocrinologia (LIE), dependiente de la Universidad de Buenos Aires y del CONICET.

La prueba molecular de la diabetes que se plantea, se caracteriza por ser económica, eficiente, además e no contaminar al medio ambiente en su realización.

http://www.agencia.mincyt.gob.ar/frontend/agencia/post/846.

Prueba de tamizaje

La prueba de tamizaje a diferencia de la prueba común para detectar la diabetes, se diferencia enormemente debido a que en ésta trata de identificar individuos asintomáticos con riego a padecer diabetes. 

Entonces tenemos varias recomendaciones para proceder a realizarla pues la prueba de tamizaje se debe realizar a partir de los 45 años y con una frecuencia de 3 años en la población en general, este tamizaje de DM2 en la población general se debe hacer con Glucemia de Ayuno y por lo tanto de obtener una prueba de tamizaje positiva, se procederá a realizar una prueba confirmatoria.

El tamizaje de DM2 se realiza con glucemia de ayuno.La prueba confirmatoria se realiza a personas con sintomas como poliuria, polidipsia, polifagia, astenia o cetoacidosis, entro otras, es decir con una sospecha clinica. En ella se determinará la glucosa en sangre, la hemoglobina glicosilada (Hbalc), asi como los anticuerpos por método de ELISA.rueba de tamisaje 


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Conclusión: Costa Rica puede lograr la detección temprana y tratamiento oportuno de la Diabetes Mellitus tipo 2, por medio de un tamizaje en subgrupos poblacionales de alto riesgo. El esfuerzo ya se está haciendo con la estrategia oportunista. Este estudio demuestra que esta no solo se puede implementar efectivamente, sino que, además, puede realizarse con muy poco esfuerzo. Ahora bien, la organización del Sistema de Salud con base en la Atención Primaria, permitiría desarrollar otra de las estrategias de tamizaje para obtener una mayor cobertura sin alto costo, es decir, el tamizaje domiciliar. Logísticamente existen las condiciones para realizarlo; lo que se necesita es llevar a cabo un estudio comunitario controlado para ver su costo- beneficio. Si el resultado de este estudio es favorable, se podría implementar en toda Costa Rica como parte de la atención integral de la Diabetes Mellitus tipo 2, convirtiendo al país en pionero en el mundo en esta estrategia.




 http://www.scielo.sa.cr/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0001-60022006000100004

Influencia epigenómica de la actividad / inactividad física en el origen de la Diabetes mellitus tipo 2

Contrariamente al modelo centrado en las mutaciones, el cual asume que alteraciones en la función son consecuencia de mutaciones somáticas o heredadas en la secuencia del DNA, el modelo epigenético implica una carencia de regulación de uno o más genes. Un componente crítico del epigenoma son los patrones de distribución de las citosinas metiladas en secuencias de dinucleótidos CpG. Tal metilación marca los genes para su inactivación al interferir con la unión de factores de transcripción sensibles a DNA metilado o bien al reclutar proteínas que agrupan complejos correpresores y deacetilasas de histonas en torno a la cromatina. Estas marcas epigenéticas son propagadas luego mitótica y en algunos casos meióticamente, resultando en una herencia estable de estados regulatorios. Hoy se sabe que la dieta u otros factores ambientales son un punto de control para la regulación de la expresión génica y que durante periodos críticos de desarrollo, la cromatina sería particularmente sensible a modificaciones epigenómicas. De esta manera una explicación epigenómica del origen fetal de las enfermedades crónicas del adulto parece razonable. La presente revisión explica cómo la actividad/inactividad física de la madre o de la progenie en etapas tempranas, puede predisponer a Diabetes mellitus tipo 2 en la vida adulta a través de este mecanismo.

http://www.cafyd.com/REVISTA/ojs/index.php/ricyde/article/viewArticle/239

Alteraciones en la traducción: microRNA en diagnostico de la diabetes

Alteraciones en la traducción: microRNA en diagnostico de la diabetes

En el Trascriptoma de un mamífero, un 3% es ARNm y el resto es ARN no codificante, en estos se incluyen los micro RNA, estos regulan la traducción de un RNA mensajero (ARNm) blanco, que inhibe su traducción, estabilizándolo o llevándolo a su degradación. En la diabetes los micro RNA se requieren para desarrollo el páncreas, regular glucosa, control de células beta-pancreáticas maduras, tienen importante papel en diferenciación de islotes de pancreáticos.

 La des-regularización en la biogénesis y función de los microRNA contribuyen al desarrollo de enfermedades humanas. Esto nos lleva a tomar al Micro RNA como novedosas huellas para detectar patologías, que en el caso de la diabetes, se estudiaron la presencia de miR-9, miR-29a, miR-30d, miR-34a, miR-124a, miR-146a, y miR-375, en pacientes con diabetes tipo 2 de diagnostico reciente, individuos prediabeticos y individuos suceptibles con tolerancia normal la glucosa.

 
Bibliografía:

Rico M, Vega G, Oliva D. Importancia de los microRNA en el diagnóstico y desarrollo de enfermedades. Med Inst Mex. 2014 Jan; 52(3).